پلیت کانت آگار (Count agar plate)  برند مرک (کد 105463)

پلیت کانت آگار (Count agar plate) برند مرک محیط کشت مناسبی برای شمارش باکتری‌ها در غذا، آب و همچنین شمارش تعداد باکتری اتاق‌های استریل  است. این محصول یک بستر باکتریولوژیکی است که برای تعیین تعداد کل باکتری‌های زنده و هوازی در یک نمونه استفاده می‌شود. مقدار باکتری به صورت واحدهای تشکیل دهنده کلنی در گرم (CFU/g) در نمونه جامد و در هر میلی لیتر (CFU/ml) در نمونه مایع بیان می‌شود. تکنیک پیشنهادی تکنیک pour plate است. نمونه‌ها رقیق شده و با غلظت مناسب در صفحات پتری اضافه می‌شوند. آگار مایع استریل به این صفحات اضافه می‌شود و صفحات به آرامی می چرخند تا از مخلوط شدن یکنواخت نمونه با آگار اطمینان حاصل شود. پلیت‌ها در دمای 20 یا 30 درجه سانتی‌گراد در سه روز انکوبه می‌شوند. پس از انکوباسیون، تعداد کلنی‌ها روی صفحه با 25-250 کلنی شمارش می‌شود که دقیق‌ترین نتیجه در نظر گرفته می‌شود (هنگام محاسبه تعداد واقعی باکتری در نمونه، ضریب رقت باید در نظر گرفته شود).

ترکیب پلیت کانت آگار (PCA)

در جدول زیر می‌توانید میزان ترکیبات مصرف شده را مشاهده کنید:

روش مصرف (PCA)

برای استفاده از این ماده 23.5 گرم را در 1000 میلی لیتر آب مقطر معلق کنید، سپس آن را حرارت دهید تا به جوش آید تا در محیط کاملا حل شود. در این مرحله با اتوکلاو کردن با فشار 15 پوند (121 درجه سانتی‌گراد) به مدت 15 دقیقه استریل کنید. حال تا دمای 45-50 درجه سانتی‌گراد باید خنک شود. حال مواد را خوب مخلوط کنید و در صفحات پتری استریل بریزید.

محدودیت‌های استفاده Count agar plate

این محلول کشت یک محیط کشت عمومی است و ممکن است از رشد ارگانیسم‌های مقاوم پشتیبانی نکند. توصیه می‌شود از این ماده برای شناسایی کامل، آزمایش بیوشیمیایی، ایمونولوژیک، مولکولی یا طیف سنجی جرمی روی کلنی‌های حاصل از کشت خالص استفاده شود.

تفسیر نمونه پلیت کانت آگار (Count agar plate)

 همان طور که گفته شد، مقدار باکتری در واحدهای تشکیل دهنده کلنی در گرم (CFU/g)، در نمونه جامد و در هر میلی‌لیتر (CFU/ml) در نمونه مایع بیان می‌شود. این مقدار را می توان با چندین تکنیک مشخص کرد:

1.    روش استاندارد (SMA)

پلیت کانت آگار (Count agar plate) روش استاندارد (SMA) نیز نامیده می شود. در این روش 1 میلی لیتر از تلقیح را به ظروف پتری استریل منتقل کنید. در هر ظرف تقریباً 15 میلی لیتر از محیطی که به دمای 44-47 درجه سانتی‌گراد رسیده است بریزید. مواد را کاملاً همگن کنید و بگذارید روی سطح سرد جامد شود. در دمای 1 ± 30 درجه سانتی‌گراد به مدت 3 ± 72 ساعت انکوبه کنید.
نکته: در صورت مشکوک بودن به وجود کلنی‌هایی که به سطح آگار حمله می‌کنند، می‌توان لایه دوم آگار را پس از برداشتن جرم اول (تقریباً 4 میلی لیتر) ریخت.

2.    روش صفحه پخش

ظروف را در فر با درب باز خشک کنید. در سطح محیط، 0.1 میلی‌لیتر از نمونه مورد تجزیه و تحلیل را انتقال دهید. تلقیح را با استفاده از پخش کننده استریل روی سطح تلقیح کنید. در دمای 1 ± 30 درجه سانتی‌گراد به مدت 3 ± 72 ساعت انکوبه کنید.

تجزیه و تحلیل داده‌ها

برای تجزیه و تحلیل داده‌ها می‌توانید از موارد ذکر شده کمک بگیرید:
• در دمای 30 درجه سانتی‌گراد به مدت 72 ساعت برای تشخیص میکروارگانیسم‌های مزوفیل.
• در دمای 55 درجه سانتی‌گراد برای میکروارگانیسم‌های گرما دوست.
• در دمای 6.5 درجه سانتی‌گراد برای میکروارگانیسم‌های روانگردان 
پس از انکوباسیون، کلنی‌ها را روی ظروف حاوی 10 تا 300 کلنی بشمارید. هنگام محاسبه تعداد واقعی باکتری در نمونه، ضریب رقت باید در نظر گرفته شود.  همچنین هنگامی که روی PCA آگار مکمل با شیر کشت می‌شود، باکتری‌های کازئولیتیک هاله سبک‌تری در اطراف هر کلنی تشکیل می‌دهند (پروتئولیز کازئین شیر).

خرید پلیت کانت آگار

همان طور که مشاهده کردی این محصول برای کشت میکروبیولوژیکی و غیر انتخابی مناسب است و می‌توان کلونی‌ها را بر روی سطح آن شمارش کرد، همچنین این محیط کشت یک محیط جامد است. برای خرید انواع محصولات آزمایشگاهی به ویژه پلیت کانت آگار مرک Count agar plate (PCA) می‌توانید به فروشگاه اینترنتی رازی طب آریا کوشا مراجعه کنید.