یکی دیگر از محصولات محیط کشت تولید شده توسط برند مرک، براث B.G.B یا (brillian green broth) است که برای تشخیص یا تایید باکتریهای کلیفرم در آب و فاضلاب، غذاها، محصولات لبنی و سایر مواد با اهمیت بهداشتی مورد استفاده قرار میگیرد. این ماده مایع و سبز رنگ بوده و بر اساس برلیانت سبز بیل براث 2 درصد و بر اساس APHA، ISO 4831 و ISO 4832 فرموله شده است. این محیط کشت یک محیط کشت انتخابی است که برای جداسازی سالمونلا (بجز سالمونلا تایفی از مدفوع) از مواد لبنی و غذایی کاربرد دارد.
در جدول زیر میتوانید میزان ترکیبات مصرف شده را مشاهده کنید:
عناصر | میزان به GMS / لیتر |
پپتون | 10000 |
لاکتوز | 10000 |
صفرا | 20000 |
سبز درخشان | 0.0133 |
pH نهایی (در 25 درجه سانتیگراد) | 0.2±7.2 |
ویژگیهای ظاهری این محلول به شکل زیر است:
• مایع به رنگ سبز درخشان
• رنگ و شفافیت محیط آماده شده
• محلول سبز زمردی، شفاف و بدون رسوب.
• pH
• پس از انکوباسیون در دمای 35-37 درجه سانتیگراد به مدت 18-48 ساعت مشاهده شد
این محلول به شیوه زیر عمل میکند:
• هضم آنزیمی کازئین اسیدهای آمینه، نیتروژن، کربن، ویتامینها و مواد معدنی را برای رشد موجودات فراهم میکند.
• لاکتوز کربوهیدرات قابل تخمیر است. صفرا گاو و سبز درخشان باکتریهای گرم مثبت و بسیاری را مهار میکنند (باکتریهای گرم منفی، غیر از کلیفرمها)
40.01 گرم را در 1000 میلی لیتر آب تصفیه شده یا مقطر معلق کنید. در صورت لزوم حرارت دهید تا محیط کاملا حل شود. ماده حل شده را در لولههای تخمیر حاوی لولههای دورهام معکوس ریخته و با اتوکلاو در فشار 15 پوند (121 درجه سانتیگراد) به مدت 15 دقیقه استریل کنید. تا در دمای 45-50 درجه سانتیگراد خنک شود. خوب مخلوط کنید و در صفحات پتری استریل بریزید. برای تهیه استحکام مضاعف توصیه می شود که گرم شود (محلول 80.02 گرم در لیتر) در 100 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه.
تفسیر نمونه براثB.G.B (brillian green broth)
برلیانت سبز بیل براث 2 درصد یکی از پرمصرفترین محیط کشت برای تشخیص باکتریهای کلیفرم در آب، فاضلاب، غذاها و شیر و محصولات لبنی است. این محیط بر اساس APHA برای شناسایی و تایید باکتریهای کلیفرم فرموله شده است. این ماده همچنین توسط کمیته ISO برای شمارش کلیفرمها با روش عددی محتمل مورد تایید قرار گرفته است.
پپتون در این محلول به عنوان منبعی از مواد مغذی ضروری عمل کرده، لاکتوز کربوهیدرات قابل تخمیر بوده و صفرا باکتریهای گرم مثبت را مهار میکند. در حالی که باکتریهای گرم منفی توسط green broth مهار میشوند. در این محلول تولید گاز از تخمیر لاکتوز تشخیص داده میشود.
با ترکیب لوله دورهام معکوس، که نشان دهنده شواهد مثبت کلیفرم مدفوعی از کلیفرمهای غیر مدفوعی است، هنگام رشد در این محیط گاز تولید نمیکند. تولید گاز بیشتر در EC براث (M127) در دمای 45 درجه سانتیگراد به عنوان تاییدیه کلیفرم مدفوع در صورت تضعیف صفرا یا مهار green broth در اثر واکنش، تشکیل دهنده گرم مثبت ممکن است گاز تولید کند.
در طول بررسی نمونههای آب، رشد در لولههای احتمالی مثبت نشان دهنده گاز در لاکتوز براث (M026) یا براث لوریل تریپتوز (M080) که در برلیانت سبز بیل براث 2 درصد (M121) تلقیح میشود.
برای نمونههای مواد غذایی و لبنیات، طبق دستورالعمل از تکنیکهای مناسب برای جمع آوری و پردازش نمونه پیروی کنید. برای نمونههای آب، نیز باید از تکنیکهای مناسب برای جمع آوری نمونه، پردازش طبق دستورالعملها و استانداردهای پیروی کنید. نکته قابل توجه این است که پس از استفاده، مواد آلوده باید قبل از دور ریختن با اتوکلاو استریل شوند.
در این بخش نکات ایمنی برای استفاده از این محلول را بیان میکنیم:
• قبل از باز کردن ظرف، برچسب را بخوانید. از دستکش محافظ ، لباس محافظ، محافظ چشم، محافظ صورت استفاده کنید.
• هنگام کار با نمونهها و کشت، از روشهای آزمایشگاهی میکروبیولوژیکی خوب پیروی کنید.
• هنگام کار با نمونهها باید دستورالعملهای تعیین شده رعایت شود.
• دستورالعملهای ایمنی ممکن است به صورت جداگانه ارجاع شود
همان طور که مشاهده کردید این محصول برای کشت میکروبیولوژیکی و انتخابی مناسب است و میتوان باکتریهای کلیفرم در آب و فاضلاب، غذاها، محصولات لبنی و سایر مواد با اهمیت بهداشتی تشخیص داد، همچنین این محیط کشت یک محیط مایع است. برای خرید انواع محصولات آزمایشگاهی به ویژه براث B.G.B (brillian green broth) برند مرک میتوانید به فروشگاه اینترنتی رازی طب آریا کوشا مراجعه کنید.
نوع: مایع
رنگ: سبز درخشان
کاربرد: تشخیص یا تایید باکتری های کلیفرم و انتخابی
شفاف و بدون رسوب